Старейший художественный музей Милана, открыт в 1618 году во дворце святого Амвросия. В настоящее время Амвросианская пинакотека занимает второе место по объему коллекции после пинакотеки Брера. Здесь представлены многочисленные произведения искусства мастеров ломбардской, венецианской и тосканской школы. Среди них особую ценность представляют такие шедевры как: «Портрет музыканта» Леонардо да Винчи, «Поклонение младенцу» Доменико Гирландайя, «Корзина с фруктами» Караваджо, «Поклонение волхвов» Тициана, «Мадонна под балдахином» Сандро Ботичелли. Также здесь можно видеть скульптуры, эскизы «Битвы Константина I с Максенцием» Джулио Романо, «Афинской школы» Рафаэля, наброски витражей Миланского собора работы Пеллегрино Тибальди.
Своеобразным дополнением к Амвросианской пинакотеке служит библиотека святого Амвросия. В ней хранится 700 тысяч бесценных изданий и старинных манускриптов. Самым известным достоянием библиотеки является «Атлантический кодекс» Леонардо да Винчи.